ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier BEH色譜柱的清洗、再生和存放

更新時間:2024-10-17      點擊次數:1269

a. 清洗與再生

  如果發生峰形改變、譜峰分叉、出現肩峰、保留時間改變、分離度變化或柱壓升高,說明色譜柱可能已被污染。通常情況下,用純有機溶劑進行沖洗(小心避免緩沖鹽出現析出)就足以去除污染物。如果沖洗不能解決問題,可采用以下清洗和再生步驟。

  根據樣品和/或您認為污染色譜柱的物質的性質,選擇與之匹配的常規清洗方法(見表3)。

  請使用20倍柱體積的溶劑沖洗色譜柱。升高柱溫可提高清洗效率。如果清洗和再生之后色譜柱性能仍然很差,請致電當地的沃特世辦事處獲得更多支持。

  50:50乙腈/水沖洗BEH HILIC色譜柱,去除極性污染物。如果此沖洗操作不能解決問題,可用5:95乙腈:水沖洗色譜柱。

  要清洗BEH Amide色譜柱中的極性污染物,請運行10 min內水從0增加到100%的梯度。請注意,隨著水的比例上升,柱壓也將迅速增大。在含水量大于60%的條件下運行時,請降低流速。必要時請重復該操作。

3.ACQUITY BEH色譜柱的推薦pH和溫度限值

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4.反相色譜柱清洗順序

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* 在使用THF或正己烷之前,確保系統與這些溶劑兼容。只有在利用純反相有機溶劑(如乙腈)無法清洗色譜柱時,方可考慮使用諸如THF或正己烷之類的溶劑。降低流速,使用較低的操作溫度并盡量減少系統與THF/或正己烷的接觸。

** 使用低有機溶劑含量的溶液,以避免出現緩沖鹽析出。

 

b. 存放

  如果反相色譜柱需要在室溫下存放超過四天,應將其保存于100%乙腈中。對于高溫應用,請在使用后立即使用100%乙腈保存色譜柱,以便盡可能延長色譜柱使用壽命。切勿使用

緩沖鹽保存色譜柱。如果流動相中含有緩沖鹽,則先用10倍柱體積(常規色譜柱體積請參見表1)的HPLC級水沖洗反相ACQUITY BEH色譜柱,再用100%乙腈替換柱內的水,然后

儲存。如果不執行這個中間步驟,在引入100%乙腈時,色譜柱內可能會出現緩沖鹽析出。BEH Amide色譜柱在保存100%乙腈前先進行梯度沖洗至100%乙腈以將所有水相溶劑從柱中沖洗干凈。將色譜柱完全密封,防止柱床因溶劑蒸發而變干。

  如果BEH HILIC色譜柱需要存放超過四天,應將其保存于95:5乙腈:水中。切勿使用緩沖液保存色譜柱。如果流動相中含有緩沖鹽,則用10倍柱體積的95:5乙腈:水沖洗色譜柱(常規色譜柱體積請參見表1)。

  注:如果色譜柱運行了含甲酸鹽(如甲酸銨、甲酸等)的流動相,并且之后使用100%乙腈進行沖洗,那么在重新安裝色譜柱并再次運行含甲酸鹽的流動相時,柱平衡花費的時間可能略長。


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