如何選擇合適的亞三微米色譜柱

更新時間:2025-04-16      點擊次數:573

2.×μm UHPLC色譜柱

  要完全實現UHPLC色譜柱的更高柱效,就必須讓液相系統的擴散效應對色譜柱的影響盡可能小。小顆粒色譜柱,會讓色譜峰更窄更尖銳,提高分離度;但是,更窄的色譜峰,對柱外擴散體積更為敏感。因此,根據系統的擴散體積,匹配合適的色譜柱規格,對于實現分離性能至關重要。

 

如何選擇合適的亞三微米色譜柱?

根據如下四步驟加以考慮:

色譜填料/鍵合相的選擇性與耐受性:滿足目標應用的需要;

色譜柱長與粒徑的比值L/dp:色譜柱的柱效水平是否滿足目標應用的分離度需求;

柱長L與粒徑dp對柱壓的影響:考慮色譜柱運行柱壓,是否能兼容您的液相系統;

色譜柱內徑:對于擴散體積較大的系統,選擇4.6 mm內徑,可以減少系統對柱效的影響程度。

 

色譜柱規格選擇指導

image.png

系統

HPLC

UHPLC

UPLC

擴散體積測量值

>40μL

22-29μL

<20μL

常規操作壓力

<4000 psi

<10,000 psi

<18,000 psi

色譜柱粒徑

3-5μm

2-3μm

<2μm

色譜柱內徑

4.6 mm (3.0 mm)

3.0mm (2.1mm)

2.1mm (1.0 mm)

色譜柱長度

75-250mm

50-100mm

150mm

以上根據Waters LC系統來推薦色譜柱規格。

 

對任何LC系統都適用的柱規格

在轉移LC方法時,儀器譜帶展寬是需要確定的十分關鍵的LC儀器參數之一。了解譜帶展寬,能幫助色譜分離化學家所開發的方法,兼容任何一臺LC系統。如下色譜柱規格表,基于儀器譜帶展寬名義測量值。

系統

LC技術

譜帶展寬*

推薦色譜柱的粒徑與內徑

Shimadzu   Prominence UFLC

HPLC

41μL

XBridge 3.5, 5μm; XSelect 3.5, 5 μm;

CORTECS 2.7 μm

3.0–4.6 mm I.D.

Alliance 2695   HPLC

HPLC

29 μL

Agilent 1260   UHPLC (600 bar)

HPLC

28 pL

Thermo Accela   UHPLC

HPLC

21μL

XBridge 2.5, 3.5, 5 μm; XSelect 2.5, 3.5,   5 μm;

CORTECS 2.7 μm 3.0 mm I.D.

Agilent 1290   UHPLC (1200 bar)

UHPLC

17 μL

ACQUITY Arc

UHPLC

23 μL

XBridge 2.5, 3.5, 5 μm; XSelect 2.5, 3.5,   5 μm;

ACQUITY UPLC HSS 1.8 μm,

CORTECS 2.7 μm

3.0 mm I.D.

ACQUITYUPLC

UHPLC

12 μL

ACQUITY UPLC BEH 1.7 μm;

ACQUITY UPLC CSH 1.7 μm;

ACQUITY UPLC HSS 1.8 μm,

CORTECS 1.6 μm

2.1 mm I.D.

ACQUITY UPLC   H-Class W/Column Manager

UPLC

12 μL

ACQUITY UPLC   H-Class

UPLC

9μL




























*這些測量數值基于未經調整的儀器,僅作為參考。對于系統的泵、管路連接、以及儀器參數的任何調整,都會改變該儀器的譜帶展寬。


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