XTerra色譜柱的前處理和操作使用
為確保XTerra™色譜柱具有最佳的性能，請遵守以下操作指導:
a.保護柱
在進樣器和分析柱之間使用填料化學和顆粒大小都適合的保護柱對于保護分析柱至關重要。請選擇高性能的保護柱以便在保護分析柱的同時不會影響到分離效果。
保護柱需要定期更換，更換的周期主要取決于樣品的干凈程度。當系統壓力上升至超過某個設定值或者突然出現色譜峰分叉的現象，往往是需要更換保護柱的信號。
b.樣品前處理
1. 樣品中的雜質通常會污染色譜柱，建議采用合適的SPE技術(Oasis或Sep-pak)凈化樣品來避免這個問題。
2.用流動相或比流動相洗脫強度弱的溶液(含有較少有機溶劑)溶解或稀釋樣品可以獲得最好的峰形和檢測靈敏度。
3.果樣品在流動相中不溶解或者溶解度很差時，要確保樣品、樣品溶液和流動相是互溶的，以避免樣品在流動相中析出。
4. 用0.2μm的濾膜過濾樣品以充分去除顆粒雜質，如果樣品溶解在含有機溶劑的改性劑(如乙腈、甲醇)的溶劑中，在選擇濾膜時要注意膜的材質不會在該溶劑中溶解，也可以在8000rpm轉速的條件下離心20分鐘后移取上清液進樣。
c.pH使用范圍
XTerra™色譜柱的建議pH使用范圍比硅膠基體色譜柱的寬，XTerraMS色譜柱的pH使用范圍是1-12，XTerra RP色譜柱的pH使用范圍是2-11。值得指出的是:色譜柱的壽命取決于所用緩沖液的種類、濃度和溫度。
以下的表格2，3，4列出了建議使用的不同pH的緩沖溶液體系，可以作為開發LC方法的參考。請注意在高溫條件下使用磷酸鹽緩沖體系會對柱壽命有很大的影響，盡管XTerra色譜柱比硅膠基體色譜柱具有更長的壽命。
表2:XTerra™色譜柱建議使用的緩沖溶液體系(pH1-7)
表3:XTerra™色譜柱建議使用的緩沖溶液體系(pH 7-12)
表4:XTerra™色譜柱建議使用的緩沖溶液體系(pH9-12)
d.溶劑
為了使色譜柱的性能達到最好，建議使用高品質的色譜溶劑。所有水相流動相在使用前都必須經過0.2μm濾膜過濾，建議使用Gelman Acrodisc過濾器。含有懸浮顆粒的溶劑通常會堵塞色譜柱入口濾片，這將導致柱壓升高，分離度變差。
溶劑使用前需要充分脫氣，這可以避免在泵和檢測器內出現氣泡，同時建議使用在線脫氣裝置，由于在運行低壓梯度時水相和有機溶劑混合會產生氣泡，因此充分脫氣尤為重要。
e.壓力
所有XTerra™色譜柱能夠耐受6000psi(400bar)的壓力，為了獲得更長的使用壽命，我們還是建議色譜柱盡可能在低于4000~5000psi壓力下使用。
f.溫度
XTerra™色譜柱的建議使用溫度是20-60℃，高溫可以提高分離選擇性、降低流動相粘度并同時提高傳質速率。然而，超過室溫使用色譜柱對柱壽命有都負面影響，其影響程度取決于流動相pH和所使用的緩沖體系。
g.等度分離方法的轉移
請根據如下公式計算不同規格的色譜柱相應的體積流速(保持流動相的線速度不變)、上樣量和上樣體積:
如果色譜柱內徑和長度改變:
F2=F1×(r2/r1)
上樣量2=上樣量1X(r2/r1)×(L2/L1)
上樣體積2=上樣體積1X(r2/r1)2×(L2/L1)
其中，r代表色譜柱內徑
F代表體積流速
L代表柱長
1代表初始色譜柱
2代表目標色譜柱
