固相萃取柱的使用過程

更新時(shí)間:2023-07-24      點(diǎn)擊次數(shù):2014
固相萃取柱是一種基于化學(xué)吸附原理的樣品預(yù)處理技術(shù),可以用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的樣品制備和分離純化。
使用過程:
活化:也稱溶劑化,加入合適的溶劑使吸附劑上的官能團(tuán)展開,并除去吸附劑上可能存在的干擾物,對(duì)于反相吸附劑常常用中等極性溶劑(比如甲醇),正相吸附劑常常用弱極性或非極性溶劑(比如己烷); 
平衡:除去活化溶劑為上樣創(chuàng)造適宜的溶劑環(huán)境,所用溶劑通常與樣品溶液的溶劑一致;對(duì)于離子交換柱,如果樣品是堿性化合物平衡液中往往需要加入酸,如果樣品為酸性化合物平衡液中往往需要加入堿; 
保留:當(dāng)樣品溶液通過吸附劑,吸附劑與某些化合物的作用力超過后者與溶劑的作用力時(shí),這些化合物就會(huì)被吸附劑固定,該過程稱為保留; 
淋洗:上樣后,部分干擾物與目標(biāo)化合物同時(shí)被保留,需要加入合適的溶液以最大可能地除去干擾物而不影響目標(biāo)化合物的保留,通常情況下用上樣時(shí)的樣品溶劑淋洗不會(huì)影響回收率,但洗脫強(qiáng)度較人的溶劑能較大程度地去除干擾物,選擇淋洗液時(shí)需要在回收率和凈化效果間找到平衡點(diǎn); 
洗脫:讓洗脫能力較強(qiáng)的溶劑通過吸附劑,打斷吸附劑與被保留的化合物之間的作用力,使這些化合物隨溶劑從吸附劑中流出;通常情況下,能剛好洗脫目標(biāo)化合物的洗脫溶劑是很好的選擇,此時(shí)洗掉的干擾物最少,選擇洗脫液時(shí)也需要在回收率和凈化效果間找到平衡點(diǎn)。  
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